
Actualización I: Mitosis
Material biológico
Raíces apicales de Allium sativum o Allium cepa de 5 a 10 mm de longitud.
Procedimiento
Paso 1: Fijación
Fijar las raíces por inmersión en una solución de alcohol 95° y ácido acético glacial en las proporciones 3:1 durante 12 – 24 horas o de una clase a la siguiente.
Paso 2: Lavado post fijación
Posterior a la fijación, lavar las raíces con agua destilada.
Paso 3: Hidrólisis:
Colocar las raíces en HCl 1N a temperatura ambiente durante 20 minutos.
Paso 4: Lavado post hidrólisis
Luego de la hidrólisis, lavar las raíces con agua destilada.
Paso 5: Coloración
Aplicar la hematoxilina del kit durante 20 – 30 minutos.
Paso 6: Lavado post coloración
Tras la coloración, lavar las raíces con agua corriente (tibia) durante 1 minuto o a temperatura ambiente 2 – 3 minutos.
Paso 7: Aplastado
- Colocar la raíz sobre un portaobjetos y realizar el aplastado de la misma con el cubreobjetos o,
- Colocar la raíz sobre un portaobjetos y pisarla con una varilla de vidrio o similar para separar las células.
Paso 8: Observación
Observar con detenimiento cada célula para buscar las que estén en mitosis. La observación puede requerir algo de tiempo y paciencia, pero al haber fijado el material, se puede continuar con la observación en la siguiente clase.


